廣東環(huán)凱生物在細胞培養(yǎng)領域,有多種經(jīng)典且廣泛使用的培養(yǎng)基,我司針對不同類型的細胞和實驗需求進行了優(yōu)化。以下是一些最著名和常用的經(jīng)典培養(yǎng)基:
一、基礎培養(yǎng)基 (最常用和核心的類別)
DMEM培養(yǎng)基
特點:由 Eagle's MEM 改良而來,含有更高濃度的氨基酸和維生素,以及更高濃度的葡萄糖(通常為 4500mg/L,稱為“高糖 DMEM”),也有低糖版本(1000m g/L)。 環(huán)凱DMEM部分產(chǎn)品含有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(G-MAX)谷氨酰胺的L型異構體,具有生物活性,對多種細胞功能至關重要,比谷氨酰胺穩(wěn)定性更好。
應用:適用范圍極廣,是最常用的基礎培養(yǎng)基之一。適用于多種貼壁細胞系,如 HeLa(人宮頸癌細胞)、HEK293(人胚腎細胞)、成纖維細胞、肌細胞、神經(jīng)膠質細胞等。高糖版本尤其適合快速增殖或代謝旺盛的細胞(如腫瘤細胞、胚胎干細胞);低糖型更適合代謝作用較慢、葡萄糖需求低的細胞培養(yǎng)。
MEM培養(yǎng)基
特點:成分相對簡單,含有細胞生長所需的最基本氨基酸、維生素和鹽。不含鐵離子。有 Earle's 鹽和 Hanks' 鹽兩種緩沖體系。環(huán)凱MEM部分產(chǎn)品含有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(G-MAX)谷氨酰胺的L型異構體,具有生物活性,對多種細胞功能至關重要,比谷氨酰胺穩(wěn)定性更好。
應用:適用于多種貼壁細胞系,如 HeLa、MRC-5(人胚肺成纖維細胞)、Vero(非洲綠猴腎細胞),是很多更復雜培養(yǎng)基的基礎。
RPMI1640培養(yǎng)基
特點:設計初衷是用于懸浮細胞培養(yǎng),后來發(fā)現(xiàn)也是適用于多種哺乳動物細胞。含有還原型谷胱甘肽和高濃度的維生素,緩沖體系通?;谔妓釟潲},常用于懸浮或半貼壁細胞。 環(huán)凱RPMI1640部分產(chǎn)品含有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(G-MAX)谷氨酰胺的L型異構體,具有生物活性,對多種細胞功能至關重要,比谷氨酰胺穩(wěn)定性更好。
應用:特別適用于淋巴細胞、造血細胞、雜交瘤細胞和許多腫瘤細胞系。
DMEM / F-12培養(yǎng)基
特點:最初設計用于無血清培養(yǎng)中國倉鼠卵巢細胞,含有更廣泛的成分,包括微量元素(如鋅、銅)、脂類前體、次黃嘌呤和胸苷。DMEM / F-12 部分產(chǎn)品含有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(G-MAX)谷氨酰胺的L型異構體,具有生物活性,對多種細胞功能至關重要,比谷氨酰胺穩(wěn)定性更好。
應用:F-12應用更廣泛,常與其他培養(yǎng)基混合使用。單獨或混合用于原代細胞(尤其是上皮細胞、內(nèi)皮細胞)、神經(jīng)細胞、干細胞培養(yǎng)。DMEM/F-12 是無血清或低血清培養(yǎng)許多細胞類型(包括神經(jīng)干細胞、間充質干細胞)的常用基礎。
二、選擇培養(yǎng)基的關鍵因素
細胞類型:這是最重要的因素,不同細胞有不同的營養(yǎng)需求和偏好(貼壁 vs 懸?。?/span>
培養(yǎng)目的:是維持生長、擴增、誘導分化、生產(chǎn)蛋白還是進行特定實驗(如轉染、毒性測試)?不同目的可能需要不同培養(yǎng)基或添加物。
是否含血清:血清(如胎牛血清 FBS)提供生長因子、激素、粘附因子等,但成分復雜、批次差異大、有潛在安全風險。無血清培養(yǎng)基成分明確、批次穩(wěn)定、安全性高,但開發(fā)或優(yōu)化成本高,可能不適合所有細胞。基礎培養(yǎng)基通常需要添加血清(5-20%)才能支持大多數(shù)細胞生長。
緩沖體系:常用碳酸氫鹽/CO2 體系。某些培養(yǎng)基(如 IMDM)添加了 HEPES,提供額外的緩沖能力,對開放式操作(如顯微鏡觀察)或 CO2 控制不精確的環(huán)境有幫助。
葡萄糖濃度:高糖(如 DMEM 高糖)常用于代謝旺盛細胞(如腫瘤細胞、干細胞),低糖可能用于某些特殊細胞或減少乳酸積累。
添加劑:抗生素(青霉素/鏈霉素)、谷氨酰胺(細胞必需氨基酸,在培養(yǎng)基中不穩(wěn)定,常單獨添加)、非必需氨基酸、丙酮酸鈉等常根據(jù)需求添加。
關于細胞培養(yǎng)基小結
DMEM, MEM, RPMI-1640 是最基礎、最通用、應用最廣泛的經(jīng)典基礎培養(yǎng)基。
DMEM/F12 是原代細胞、干細胞無血清/低血清培養(yǎng)的常用基礎。